En la batalla de Anghiari, una fuerza milanesa se enfrentó a las tropas de la Liga italiana. El ejército de la Liga Italiana involucró fuerzas de la República de Florencia con el apoyo de las tropas papales. También había un grupo de Caballeros de la República de Venecia, así como hombres de Anghiari. Al final del día, el resultado de la batalla fue una victoria para el ejército florentino. Significaba que el control de Florencia sobre el centro de Italia estaba asegurado.

Para el pueblo de Florencia, la Batalla de Anghiari fue una victoria importante para ellos. A principios del siglo XVI, para conmemorar su victoria, contrataron a Leonardo Da Vinci para pintar un mural de La batalla de Anghiari. El mural fue para el Salone dei Cinquecento (Salón de los Quinientos) del Palazzo Vecchio de Florencia. La pintura de la Batalla de Anghiari iba a ser una de las obras más ambiciosas de Da Vinci. Iba a ser un trabajo a gran escala que medía un enorme tamaño de 54 pies por 21 pies. El objetivo era tener tres escenas que mostraran el principio, el medio y el final de la batalla.

Gracias a los estudios preparatorios de Leonardo Da Vinci que aún existen, se sabe mucho sobre la pintura. Por ejemplo, produjo dos estudios de hombres gritando como parte de su investigación para la pintura. De las tres secciones, la escena central de la batalla es la más conocida en la actualidad. La escena en la pieza central de la imagen es de cuatro jinetes de caballos y caballería que chocan. La imagen muestra a los jinetes luchando por el control del estandarte en la Batalla de Anghiari. Lo que se puede ver es el comandante florentino, Pier Giampaolo Orsini, a punto de arrancarle el estandarte al líder milanés Niccolo Piccinino.

La imagen retrata una sensación de poder y emoción junto con una sensación de furia y violencia. Esto no es solo en las caras de los soldados sino también en los caballos. Los escritores de la época comentaron sobre el diseño de Da Vinci. Mencionan su habilidad en el diseño de los uniformes de los soldados, así como las audaces facciones de los caballos. El hecho de que sepamos tanto sobre la pieza central probablemente se deba al hecho de que hay copias de la misma. Una de esas copias fue de Peter Paul Rubens en 1603. Aunque no es una copia exacta, el dibujo de la sección central muestra cómo podría haber sido. El dibujo de Rubens ahora cuelga en el Louvre, París.

Da Vinci no completó la pintura de la Batalla de Anghiari. Dejó de trabajar en la pintura en 1505 cuando se fue de Florencia a Milán. Aunque abandonado, las partes que había completado permanecieron en el Salón durante algunos años después. Al trabajar en la obra de arte, Da Vinci decidió utilizar una técnica conocida como encáustica, que se traduce como "fijación por calor". El método consiste en pintar con cera caliente.

Requiere calentar cera de abejas y agregarle pigmentos de colores. Debido a que la técnica que planeaba usar era nueva, Da Vinci llevó a cabo una prueba. Lo hizo aplicándolo a una tabla que se secó bien en un ambiente cálido. En su pintura de la batalla, Leonardo Da Vinci quiso usar colores al óleo en la pared con su gruesa capa de cera. Lamentablemente, el trabajo en la pintura no estuvo exento de problemas.

Colocó grandes braseros de carbón cerca del cuadro. Probablemente debido al gran tamaño de la pintura, Da Vinci no pudo hacer que el calor de los braseros se extendiera uniformemente sobre ella. El resultado fue daño a la pintura. Si bien pudo salvar la parte inferior de la obra, los colores de la parte superior terminaron mezclándose. Como la pintura de la batalla era tan grande, a Da Vinci se le ocurrió un diseño único para el andamiaje que necesitaba. El diseño significaba que podía levantarlo o plegarlo de una manera que cambiara su altura o posición.

Al poder hacer esto, significaba que era más fácil para él completar la sección superior de su obra de arte. A pesar de todos los problemas que tuvo Da Vinci, el trabajo fue visible durante varios años. Como tal, pintores como Rubens supieron copiarlo, y hoy tenemos constancia de la gran obra. En algún momento entre 1555 y 1572, la pintura se perdió cuando Giorgio Vasari realizó trabajos en el 'Salón de los Quinientos'. Muchos piensan que la imagen permanece en la sala y que Vasari simplemente la cubrió.

La pintura de Da Vinci que celebra la Batalla de Anghiari es una obra de arte perdida. Algunos creen que todavía existe bajo uno de los frescos posteriores en el Salón de los Quinientos en el Palazzo Vecchio. A pesar de las encuestas, no se han encontrado pruebas que demuestren de una vez por todas que la pintura existe.