Het thema van de Maagd en Kind met Sint Anna was een populair thema in het 15e-eeuwse Florence. De cartoon wordt algemeen beschouwd als voorbereidend werk voor een schilderij vanwege zijn formaat, het is getekend over acht vellen papier en is meer dan 140 cm (55 inch) hoog.

Maar de tekening is niet geprikt om op doek over te brengen en geen enkel schilderij van Leonardo da Vinci komt overeen met de compositie. Da Vinci's schilderij De maagd met kind met Sint-Anna, dat in het Louvre hangt, laat Sint-Jan weg en heeft een meer rigide en minder naturalistische compositie.

De cartoon, getekend met houtskool en krijt op getint papier, is een goed voorbeeld van da Vinci's complexe compositie en realisme. Het oog volgt de blik van Sint Anna naar haar dochter Maria die op haar beurt het Christuskind bewonderend aankijkt. De kinderen zijn nieuwsgierig, Jezus kronkelt weg van zijn moeder en houdt zijn hand omhoog alsof hij zegenend is naar zijn aan de grond genagelde neef.

De onschuldige uitdrukking van Christus weerspiegelt die van zijn moeder, terwijl die van John zich de meer wetende blik van zijn grootmoeder herinnert. St Anne's hand wijst omhoog naar de hemel, tussen de gezichten van de twee jonge jongens. De religieuze symboliek doet echter geen afbreuk aan de intimiteit van dit charmante familieportret. Zoals Anne en Mary een privémoment lijken te delen, doen John en Jezus dat ook.

Het licht valt op Maria en Jezus en maakt duidelijk dat zij centraal staan. Anne en John zijn meer in de schaduw. Dit vestigt opnieuw de aandacht op het verband tussen Maria en Jezus, en hun onschuld vergeleken met de relatieve wereldsgezindheid van Anna en Johannes. De structuur is een losse piramide. Er is een sterke diagonale lijn van de gezichten van de vrouwen naar de jongens, en een andere gecreëerd door de knieën van de vrouwen en de schouder van St. John.

Maagd en kind met St. Anne en Johannes de Doper, ook bekend als de Burlington House Cartoon naar het Londense huis van de Royal Academy of Arts, hangt nu in de National Gallery in Londen. In 1962 werd het te koop aangeboden, maar het werd zo belangrijk gevonden dat het National Arts Collections Fund, samen met donaties van het publiek, voldoende geld ophaalde om het in het Verenigd Koninkrijk te houden.

In 1987 werd het met een jachtgeweer vernield en veroorzaakte grote schade, die sindsdien is gerepareerd. Hoewel onvoltooid, wordt het werk algemeen beschouwd als een meesterwerk. De gezichten en torso's zijn prachtig weergegeven, evenals de plooien van de kleding. De natuurlijke en betekenisvolle poses en uitdrukkingen van de groep zijn ongeëvenaard, zelfs in de voltooide schilderijen van da Vinci.